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免責聲明:本文內容來自互聯網,如有不慎侵害的您的權益,請告知我們,將盡快刪除。 這個”血清熱滅活”的場景很熟悉嗎? 你有可能在浪費時間!
細胞生物學家比較了正常熱滅活胎牛血清對各種細胞株的生長能力影響,發現11株細胞中,熱滅活對6 株細胞有負面影響(紅)、3株無影響(綠)、2株有微弱正面改善(黃)(下圖1)。
▲圖1:使用未滅活或滅活血清的細胞生長狀況。
所以,在正常操作下,熱滅活通常對“細胞生長”沒有明顯的促進作用,反而會破壞血清內生長因子,維生素,氨基酸等珍貴物質,降低細胞增殖速度。 血清熱滅活的缺點
萬一小艾設錯水浴溫度或忘記按計時器,都會導致過高的加熱溫度(下圖2)或過長的加熱時間(下圖3),進而大大降低血清的功能,影響細胞生長的表現。 ▲圖2:過高的加熱溫度降低大多細胞株生長速度(僅一株未受明顯影響)。 ▲圖3:過長的加熱時間降低大多細胞株生長速度(僅一株未受明顯影響)。 且滅活加熱過程會增加血清的沉淀狀況,而沉淀又常常被認為是微生物的污染,進而耗費大量時間及精力驗證是否污染,導致實驗一再拖延。 我的細胞一定要用滅活血清怎么辦?
在滅活過程中,除了需要嚴格監測加熱溫度及認真計算時間,還有幾個小技巧可以注意噢!
滅活時,水浴槽水面與血清液面等高。 ▲圖4:300ml刻度水位需要60分鐘加溫;500ml刻度水位僅需40分鐘加溫。 至于血清瓶漂浮的問題,套上燒瓶用鉛環(下圖5)就解決啦! 滅活后,使用冷水浴降溫! 養細胞的各位 自己的實驗步驟了呢? 本文重點 現代血清加工技術進步,熱滅活已成為非必要步驟。 熱滅活對細胞生長沒有明顯促進作用,反而會破壞血清、增加沉淀狀況。 除非文獻指出該細胞必須使用滅活血清,一般細胞培養可省略血清熱滅活步驟。 如果必須使用滅活血清,加熱時水浴槽水面高度盡量與血清液面等高;滅活后使用冷水浴取代冰箱降溫,能最大程度減少對血清的破壞。直接選擇購買已滅活的血清產品,也是個好選擇噢!
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