Turbo Chemically Competent Cell 使用說明書
產品說明:
Turbo 菌株是生長最快的大腸桿菌菌株。平板上 6.5 小時可見克隆,營養液中搖菌 4-6 小時可提取質粒,缺失核酸內切酶 (endA),提高了質粒 DNA 的產量和質量;Turbo 菌株可嚴格控制 lacl q的表達,可以克隆毒性基因;fhuA2 突變賦予 Turbo 菌株對噬菌體 T1 的抗性;lacZΔM15 的存在使 Turbo 可用于藍、白斑篩選。Turbo 感受態細胞經特殊工藝制作,pUC19 質粒檢測轉化效率>5×108 cfu/μg。
產品組成:
組 分
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Turbo Chemically Competent Cell
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10 × 100 µL
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50× 100 µL
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pUC19(control vector,10pg/μL)
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10μL
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10μL
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* 基因型:F' proA+B+ lacI q ΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10) Tet S endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5
儲存條件:
-80℃±10℃保存6個月。請勿將本品置于-20℃或液氮中保存。
使用方法:
1. 將感受態細胞從-80℃冰箱中取出,置于冰水浴中融化。
2. 將目的DNA(質粒或連接產物)加入到100μL感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育30分鐘。
3. 42℃水浴熱激45秒后,立刻置于冰上,靜置2~3分鐘,晃動會降低轉化效率。
4. 向離心管中加入200μL無抗LB、TB或SOC培養基,混勻后于220rpm,37℃搖床振蕩復蘇60分鐘,使轉化物表達抗性基因。
5. 根據實驗要求吸取適量菌液,涂布至相應抗生素的2YT或LB培養基上,室溫正置10分鐘,待菌液被平板充分吸收后,37℃倒置培養6.5小時以上。
注意事項:
1. 感受態細胞冰水浴中緩慢融化。插入冰中8分鐘內加入目的DNA,不可在冰上放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 待轉化DNA加入體積不要超過感受態細胞體積的1/10。
3. 待轉化DNA加入感受態細胞后,請勿用移液槍吹打,輕輕彈勻即可。
4. 為確保最高效率轉化,整個操作過程應盡量輕柔,并保持冰上操作。
北京畢特博生物技術有限責任公司
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